质粒pcr结果很好，为什么酶切却做不出来
答案:1 悬赏:80 手机版
解决时间 2021-02-06 03:03
- 提问者网友：孤山下
- 2021-02-05 05:15
质粒pcr结果很好，为什么酶切却做不出来
最佳答案
- 五星知识达人网友：骨子里都是戏
- 2021-02-05 06:14
质粒pcr结果很好，为什么酶切却做不出来
既然你的质粒已经提出来了，那么感受态、转化等因素就不必再考虑了。
你看看双酶切后载体的位置有几条带，如果是两条，那说明酶切不完全，如果是一条，那说明酶切效率没问题。
pET28a分子量为5.6k，你的插入片段为500bp，如果你的质粒完全切开，载体和插入片段的摩尔比为1：1，质量比就是5.6k：0.5k，跑胶后两条带的亮度比就是10:1，所以你目的条带很淡非常正常。
换句话说，你的实验一切正常，那条500bp的条带可能本来就应该那么淡。
既然你的质粒已经提出来了，那么感受态、转化等因素就不必再考虑了。
你看看双酶切后载体的位置有几条带，如果是两条，那说明酶切不完全，如果是一条，那说明酶切效率没问题。
pET28a分子量为5.6k，你的插入片段为500bp，如果你的质粒完全切开，载体和插入片段的摩尔比为1：1，质量比就是5.6k：0.5k，跑胶后两条带的亮度比就是10:1，所以你目的条带很淡非常正常。
换句话说，你的实验一切正常，那条500bp的条带可能本来就应该那么淡。
我要举报
如以上回答内容为低俗、色情、不良、暴力、侵权、涉及违法等信息，可以点下面链接进行举报！
点此我要举报以上问答信息
大家都在看
推荐资讯