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实时荧光定量PCR与普通PCR的区别是什么?结果有何异同?能说明的问题是什么?

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解决时间 2021-02-12 22:14
  • 提问者网友:精神病院里
  • 2021-02-12 16:10
谢谢!
最佳答案
  • 五星知识达人网友:玩家
  • 2021-02-12 17:31
二者结果相同。都能说明生物体外的特殊DNA复制的整个过程的扩增效率和溶解温度情况。
区别:
1、二者系统组成不同
荧光定量PCR仪比普通的PCR仪多了荧光信号采集系统和计算机分析处理系统。
2、二者原理不同
荧光定量PCR实时监测与DNA结合的荧光染料激发的荧光,普通OCR通过检测插入DNA中核算染料的量来测定PCR最终产物量。
3、二者反应要求不同
荧光定量PCR对扩增片段有较高的要求,一般为100-300bp,普通PCR可以扩增长点的片段。





4、二者应用不同
荧光定量PCR主要是用来定量分析和确定基因转录水平的,普通的PCR仪是做定性分析和扩增基因片段,定量PCR仪可以做普通PCR仪的工作,反之不行。
5、二者测量成本不同
定量PCR仪价格较为昂贵,普通的基因扩增仪(PCR仪)只能够定性地分析是否存在目标片段。但是价格要低很多,而且运行成本也要低很多。

实时荧光定量PCR技术有效地解决了传统定量只能终点检测的局限,实现了每一轮循环均检测一次荧光信号的强度,并记录在电脑软件之中,通过对每个样品Ct值的计算,根据标准曲线获得定量结果。
参考资料来源:百度百科-实时荧光定量PCR
参考资料来源:百度百科-PCR
全部回答
  • 1楼网友:十年萤火照君眠
  • 2021-02-12 21:36
所谓实时荧光定量PCR技术,是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,最后通过标准曲线对未知模板进行“定量分析”的方法。 记住,实时荧光定量是定量分析
  • 2楼网友:拜訪者
  • 2021-02-12 20:46
荧光定量pcr法检测的是sybr green掺入到双链dna中的量。sybr green掺入到双链dna中后会发出荧光。但是只要是双链,它都掺。 而探针法是当探针结合到目标序列上以后,聚合酶降解探针后,探针上自带的荧光基团离开淬灭基团,从而发出荧光。 从两者的原理上来看,不难判断,荧光pcr法更加简单方便,而且成本低。而探针法特异性更强。
  • 3楼网友:逐風
  • 2021-02-12 19:56
荧光PCR是为了测量mRNA表达量的 普通PCR是为了扩增目的片段的
  • 4楼网友:醉吻情书
  • 2021-02-12 18:32
原理不同:荧光定量pcr实时监测与dna结合的荧光染料激发的荧光;普通pcr通过检测插入dna中核算染料的量来测定pcr最终产物量,一般是紫外光。 反应要求:荧光定量对扩增片段有较高的要求,一般为100-300bp;普通定量可以扩增长点的片段。如果不需要检测产物分子量大小,荧光定量可以不进行电泳就对产物进行定量分析,普通pcr必须电泳。 结果:荧光定量可以实现精确定量,普通pcr则不行。荧光定量体现可以看到整个扩增过程,可以看到扩增效率,溶解温度,直接得到的标准曲线等,这些是普通pcr无法实现的。 如果还不清楚建议去丁香园等网站逛逛,希望可以帮到你
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