可饲疫苗的研究进展是什么？

可饲疫苗的研究进展是什么？

国内流脑可饲疫苗针剂在国内，FMD转基因植物疫苗的研究起步较晚，但已取得了较大进展。中国农业科学院兰州兽医研究所在国家“863”项目的资助下，较早开展了FMDV转基因植物基因工程疫苗的研究，张永光研究小组将FMDV的结构蛋白基因VP1先后转入牧草百脉根和烟草中，经过多种生物学方法的检测和免疫动物试验，证明取得了较好的效果；潘丽等将O型FMDVP12X3C基因成功导入番茄和拟南芥中，基因在植物种子中能够特异性表达，将番茄叶片浸出物免疫豚鼠，豚鼠产生了特异性抗体反应，能够抵抗强毒的攻击。孙萌将FMDV的VP1基因导入烟草和衣藻叶绿体中进行重组表达，抗原蛋白含量占可溶性蛋白的2%~3%，比植物核基因组蛋白表达含量有较大的增加，说明在植物细胞器中表达外源基因对提高表达含量有一定的作用,不失为研制FMD转基因植物疫苗的一种好的尝试。国外FMDV基因工程疫苗的研制最早开始于1998年，阿根廷一研究小组将FMDVVP1基因转入拟南芥中，给小鼠注射转基因植物提取物，小鼠产生了针对VP1区135位~160位氨基酸残基多肽、结构蛋白VP1和完整病毒粒子的特异性抗体反应，这是首次利用转基因植物表达产物免疫动物产生特异性抗体的试验。1999年，WigdorovitzA等将FMDV结构蛋白基因VP1在苜蓿中有效表达，表达产物口服和注射都产生了免疫反应和保护，从而对利用转基因植物生产疫苗提供了有力的支持。2001年，CarrilloC等将FMDVVP1基因在马铃薯中表达，试图通过构建含有双元启动子表达载体来提高VP1蛋白的表达量，结果表明蛋白表达量与含有一元启动子的表达载体相比，其表达量没有显著的增加。实践证明，到目前为止，转基因植物表达的蛋白量低仍然是制约转基因植物表达系统应用的主要问题之一。现在采用的策略主要是：①病毒基因密码子的优化，根据植物密码子使用的偏好性，将病毒基因作适当的同义突变，从而提高病毒抗原蛋白的表达量；②在翻译起始处加上一段可以提高翻译效率的先导序列；③外源蛋白的靶向表达，目前人们普遍在目的基因的3′端加上一段内质网引导肽SEKDEL，将表达的蛋白定位到内质网中，从而使所表达的蛋白在内质网中累积。尽管如此，要利用植物高效表达外源蛋白，仍然是一个技术难题。精制中性蛋白酶除了利用VP1基因作为免疫原基因外，近两年来，人们逐渐将目光转移到将FMDV结构蛋白基因作为免疫原基因用于基因工程疫苗的研究上来。FMDV的结构蛋白基因P1在3C蛋白酶的作用下裂解，组装成的空衣壳保留有感染性病毒粒子的免疫原性和抗原性，利用其作为亚单位疫苗的免疫原基因是一种很好的选择。2005年，DusSantosMJ等将FMDV编码结构蛋白的P1基因和编码蛋白酶的3C基因作为免疫原基因导入紫花苜蓿，免疫小鼠产生了特异性抗体并能抵抗强毒的攻击。

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