某同学在做微生物实验时，不小心把圆褐固氮菌（可利用空气中Ｎ２合成含氮有机物）和酵母菌混合在一起，得到混合菌。请你完成得到纯度较高的圆褐固氮菌和酵母菌的分离实验步骤，并回答有关问题：

某同学在做微生物实验时，不小心把圆褐固氮菌（可利用空气中Ｎ２合成含氮有机物）和酵母菌混合在一起，得到混合菌。请你完成得到纯度较高的圆褐固氮菌和酵母菌的分离实验
步骤，并回答有关问题：
（１）主要步骤：
①制备两种培养基：一种是 培养基，另一种是加　 的培养基。分别分成
两份，依次标上Ａ，Ａ′和Ｂ，Ｂ′，备用。
②分别向Ａ、Ｂ培养基中接种　 。
③接种后，放在恒温箱中培养３～４天。
④分别从Ａ、Ｂ培养基生长良好的菌落中挑取菌种，按照Ａ→Ａ′，Ｂ→Ｂ′的方式进行接种。
⑤接种后，把Ａ′、Ｂ′培养基放入恒温箱中培养３～４天。
（２）回答问题：
在步骤①中，为保证无杂菌污染，实验中应采用的主要措施有：对培养基进行　
　 ；将　 在酒精灯火焰上灭菌；接种过程在　 附近进行。
第④⑤两个步骤的目的是获得　 。

(答案→) 解析：（1）由于圆褐固氮菌能利用空气中Ｎ２合成含氮有机物，但能被青霉素抑制，酵母菌不能固氮，但不被青霉素抑制，所以分别配制无氮培养基和含有青霉素的培养基，进行接种培养可得到纯度较高的圆褐固氮菌和酵母菌。（2）为保证无杂菌污染，对培养基进行高压蒸气灭菌。接种环要用酒精灯火焰上灭菌，接种过程在酒精灯火焰附近进行。通过操作目的是获得纯度较高的圆褐固氮菌和酵母菌。

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