10%分离胶与12%分离胶有什么区别
答案:1 悬赏:50 手机版
解决时间 2021-12-01 19:37
- 提问者网友：你挡着我发光了
- 2021-11-30 20:50
10%分离胶与12%分离胶有什么区别
最佳答案
- 五星知识达人网友：迷人又混蛋
- 2021-11-30 22:07
回答：
1、10％和12％胶的差别：
根据你目的蛋白分子量而定，如果说是分子量较大的蛋白（60KD以上），可以用10％的胶，分子量在60～30KD之间的可以用12％的胶，低于30KD的我一般都是用15％的胶了。主要在于指示线刚好跑出胶底的时候，你的目的蛋白能够恰好处于胶的中间部分。
这样直接染色拍照或者做WB都比较漂亮。
2、关于上样蛋白浓度低的问题：
有个不是太好的方法，但是我经常用来解决浓度不足的上样问题。就是loading两次啦，但是要守着电泳，看到第一次loading的样品刚好完全进入上样孔最下端的时候（就是说上样孔完全空出来了），暂停电泳，上第二次样，然后重新开始，就OK啦！（这种情况的时候建议采用恒流电泳，20～25mA，相对应的起始电压大概在60V左右吧）。
1、10％和12％胶的差别：
根据你目的蛋白分子量而定，如果说是分子量较大的蛋白（60KD以上），可以用10％的胶，分子量在60～30KD之间的可以用12％的胶，低于30KD的我一般都是用15％的胶了。主要在于指示线刚好跑出胶底的时候，你的目的蛋白能够恰好处于胶的中间部分。
这样直接染色拍照或者做WB都比较漂亮。
2、关于上样蛋白浓度低的问题：
有个不是太好的方法，但是我经常用来解决浓度不足的上样问题。就是loading两次啦，但是要守着电泳，看到第一次loading的样品刚好完全进入上样孔最下端的时候（就是说上样孔完全空出来了），暂停电泳，上第二次样，然后重新开始，就OK啦！（这种情况的时候建议采用恒流电泳，20～25mA，相对应的起始电压大概在60V左右吧）。
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