巢式pcr如何设计引物，巢式pcr怎么做巢式pcr怎么做简单呐，主要
答案:1 悬赏:80 手机版
解决时间 2021-02-16 06:21
- 提问者网友：山高云阔
- 2021-02-15 19:28
巢式pcr如何设计引物，巢式pcr怎么做巢式pcr怎么做简单呐，主要
最佳答案
- 五星知识达人网友：梦中风几里
- 2021-02-15 20:01
巢式PCR一般是有两对引物的，一对outer引物，一对inner引物。一般建议为了方便，inner引物直接根据目标序列来设计引物(和普通PCR引物设计方式一样)，而outer引物则从目标序列前后两端的序列开始设计，也就是说上下游各往前后移动一些碱基开始设计引物。outer和inner引物的设计应含有重叠区域，重叠区域一般为10bp比较合适。如果说你手上只有目标序列，没有目标序列前后的序列信息的话，你可以使用普通引物作为outer引物，之后再从序列内部设计一对inner引物，原则和之前也是一致的，也应含有10个碱基左右的重叠区域。这时候，因为你的inner引物PCR后产物会少一些碱基序列，你可以设计第三对引物，这对引物为outer和Inner引物的拼接序列，然后进行PCR，将缺失的碱基人工补上。
我要举报
如以上回答内容为低俗、色情、不良、暴力、侵权、涉及违法等信息，可以点下面链接进行举报！
点此我要举报以上问答信息
大家都在看
推荐资讯