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能不能用电击感受态细胞制备热激感受态

答案:2  悬赏:20  手机版
解决时间 2021-12-21 18:11
  • 提问者网友:世勋超人
  • 2021-12-20 20:00
能不能用电击感受态细胞制备热激感受态
最佳答案
  • 五星知识达人网友:慢性怪人
  • 2021-12-20 20:52
能不能用电击感受态细胞制备热激感受态
两种方法的原理不同:
电击法: 使用瞬时高压电(数千伏特)处理细胞悬液,微生物细胞膜在高压电的作用下发生去极化,产生微孔,悬液中溶解的核酸即可通过细胞膜上的孔洞进入细胞内部。
化学法:使用低渗溶液处理细胞悬液(0.1M CaCl2),微生物细胞膜结构会发生一些变化,使得细胞在热激时(42度90秒)变得很容易从溶液中摄取DNA。具体机理目前仍然不是十分清楚,但是很有效.
做电击转化时,悬液中有近70%的细胞会因电击而死亡,但是这种方法很直接,转化效率很高。当需要高的转化效率时,比如制作基因文库,可以采用电击转化,另外,做酵母等真核生物转化时一般都是电击。
化学转化法操作简单,不需要特殊设备,转化效率足以满足一般克隆实验的需要,故使用范围非常广。
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  • 1楼网友:山河有幸埋战骨
  • 2021-12-20 21:35
我只知道,电击时盐洗不干净,电流过大容易爆杯。
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