研究一种蛋白对病毒感染的影响有何实验思路

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解决时间 2021-03-18 02:35

提问者网友：棒棒糖
2021-03-17 21:46

最佳答案

五星知识达人网友：七十二街
2019-07-07 20:45

将目的用反转录病毒载体，将目的蛋白的基因PCR出来，酶切连接进入病毒载体，然后自己包装病毒，收集，再用之侵染目的细胞，再筛选永久表达的就行了。筛选一般用puromycin或者G418，看你的病毒载体上是什么抗性的。如果要求这个蛋白在特定时期才表达，可以在启动子区加入tet-on或者tet-off元件。这些个技术都比较成熟了。然后再用你需要观察的病毒侵染你筛选好细胞，再看效果。最主要的问题是，你的蛋白有什么功能？是影响代谢？细胞周期？细胞迁移？还是产生其他的效应分子？每种的检测方法都不同。你给的信息太少了，我也没法给出具体的实验步骤啊...

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1楼网友：鱼芗
2019-05-28 08:43

那肯定是要做试验的。那就做几个对照组。选取病毒感染细胞，一组加蛋白质，一组不加，仪器检测或者显微镜下观察，各个时段的影像，看蛋白质是加速病毒感染，还是阻止，还是没有影响。如果可以阻断，再做试验接着，用不同量得蛋白质，看不同量得蛋白质是不是可以影响阻断的速度。还要做一个排除试验。在不加病毒的同时只加蛋白质看看，此中蛋白质是否会影响试验的结果。

2楼网友：思契十里
2020-04-21 06:06

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