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DNA克隆载体有哪些重要结构元件

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解决时间 2021-03-19 21:15
  • 提问者网友:回忆在搜索
  • 2021-03-19 05:09
DNA克隆载体有哪些重要结构元件
最佳答案
  • 五星知识达人网友:深街酒徒
  • 2021-03-19 05:47
克隆载体主要包括质粒载体和噬菌体载体。
质粒载体需要:1. 起始位点;2. 两种遗传性标记,如Amp或LacZ;3. 多克隆位点(MCS)。
噬菌体载体,这里主要说伽马噬菌体载体,其需要:1. 起始位点;2,复制外壳蛋白的基因;3,互补单链粘性末端(COS位点);4,阻遏蛋白;5,酶切位点。
全部回答
  • 1楼网友:孤独入客枕
  • 2021-03-19 06:35
dna克隆载体有哪些重要结构元件   表达载体四部分:目的基因、启动子、终止子、标记基因   常用细菌质粒进行构建,构建过程中运用限制性核酸内切酶切割出与目的基因相合的末端(多为黏性末端,也有平末端),采用dna连接酶连接,导入生物体实现表达。标记基因可帮助识别质粒并检测是否成功整合到染色体dna中。   表达载体(expression vectors)就是在克隆载体基本骨架的基础上增加表达元件(如启动子、rbs、终止子等),是目的基因能够表达的载体。如表达载体pkk223-3是一个具有典型表达结构的大肠杆菌表达载体。其基本骨架为来自pbr322和puc的质粒复制起点和氨苄青霉素抗性基因。在表达元件中,有一个杂合tac强启动子和终止子,在启动子下游有rbs位点(如果利用这个位点,要求与atg之间间隔5-13bp),其后的多克隆位点可装载要表达的目标基因。
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