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在原有总RNA基础上,如何提高总RNA的量

答案:1  悬赏:40  手机版
解决时间 2021-02-20 15:34
  • 提问者网友:听门外雪花风
  • 2021-02-19 22:44
在原有总RNA基础上,如何提高总RNA的量
最佳答案
  • 五星知识达人网友:低血压的长颈鹿
  • 2021-02-19 22:56
用Trizol来提取细胞总RNA的话,一个6孔板的细胞足够了。对于贴壁培养的细胞,可将培养基吸出后直接向培养板中加入Trizol来溶解细胞,然后分次移出细胞裂解物进行后续操作即可。值得注意的是,对于所加Trizol的量,是依据培养板的面积而不是依据细胞的数量来决定用量的(一般每10cm2加1 ml)。当Trizol量不足时可导致抽提的RNA中污染有DNA。另外,在Trizol的使用说明中的注意事项提及,如果细胞量太少(100~10000个细胞),可加入800 ul的Trizol,后续裂解、加氯仿按常规操作。在用异丙醇沉淀RNA前加入5-10 ug无RNA酶的糖原作为水相的载体。其会保留在水相,与RNA共沉淀,且不影响后续的逆转录及PCR反应。
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