8m 尿素结合ni柱能重复用吗

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解决时间 2021-03-25 03:58

提问者网友：焚苦与心
2021-03-24 17:09

8m 尿素结合ni柱能重复用吗

最佳答案

五星知识达人网友：孤独的牧羊人
2021-03-24 18:11

我们实验室一般是80mM，100mM，200mM，500mM，但是用梯度洗脱有个缺点就是可能你的目的蛋白被稀释，设置成梯度进行洗脱，一般用8M的尿素加到含有咪唑的磷酸缓冲液中。洗脱目的蛋白时咪唑浓度在500mM时能将大部分蛋白都洗脱下来，如果想让蛋白纯度高的话，可以用不同的咪唑浓度，浓度降低。
溶解的话，纯化可溶性蛋白时不用加尿素尿素在纯化包涵体时用。
洗杂蛋白时咪唑的浓度一般是20mM，用去离子水溶就可以了。希望对你有所帮助

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