DNA连接反应中如何确定供体DNA与载体DNA的加入量？

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解决时间 2021-12-30 12:55

提问者网友：棒棒糖
2021-12-29 22:25

最佳答案

五星知识达人网友：旧脸谱
2022-01-10 04:03

一般载体和目的片段摩尔比是1:3~1:10，也不是一定的。
关键要看你载体、目的片段的大小以及跑胶出来的亮度，还有MARKER。
比如载体4kb，片段2kb，1bpDNA约660D，你对ligase照说明书可以算一下需要多少微摩，再算一下需要多少ngDNA。再看跑的胶，比如点了5ul的marke5kb条带是100ng，亮度和载体相同，是目的片段的两倍，那么载体一共大概有100ng，目的片段50ng。
再根据说明书上需要加的量加DNA。不懂追问啊。

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1楼网友：迟山
2022-01-10 05:18

你好！嗯，用不同的载体，可能加入量的比例不同，两者的比例挺重要的，你在实验之前先仔细看一遍说明书。希望对你有所帮助，望采纳。

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