根据GenBank中p53基因的部分序列),设计引物,确定RT-PCR的参数,检测 p53基因在血细胞中的表达情况.

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解决时间 2021-04-04 01:54

提问者网友：藍了天白赴美
2021-04-03 13:38

根据GenBank中p53基因的部分序列),设计引物,确定RT-PCR的参数,检测 p53基因在血细胞中的表达情况.
根据GenBank中p53基因的部分序列（GenBank登录号:AF136270.1）,设计引物,确定RT-PCR的参数,检测 p53基因在血细胞中的表达情况.已经登陆http://www.ncbi.nlm.nih.gov/nuccore/AF136270.1 以前完全没有接触过,无从下手,

最佳答案

五星知识达人网友：一叶十三刺
2021-04-03 15:15

现在你到了基因序列的网站,最下面的那一大段就是外显子2到9的序列.一般设计RT-PCR引物需要跨外显子交界,这样可以提高特异性.
你可以先拷贝外显子2的序列（216..289）
atgga ggagccgcag tcagatccta gcgtcgagcc ccctctgagt caggaaacat tttcagacct atggaaact
然后再拷贝外显子3的序列（407..428）
actt cctgaaaaca acgttctg
把这两段接在一起
atgga ggagccgcag tcagatccta gcgtcgagcc ccctctgagt caggaaacat tttcagacct atggaaact actt cctgaaaaca acgttctg
然后到下面这个网页设计引物
把刚才拼接得到的序列贴到最上面的方框中,然后点最下面的按钮.过一会就点“check”,会得到几组引物.结果的最上方是位置示意图.你确认一下你的reserve primer要跨在序列拼接的交接点上,就可以了.
这是我帮你做的结果

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