为什么我用BCA蛋白试剂盒测定蛋白浓度时,测得的浓度和我估计的浓度相差那么多呢?
答案:1 悬赏:80 手机版
解决时间 2021-02-03 03:46
- 提问者网友：半生酒醒
- 2021-02-02 14:55
为什么我用BCA蛋白试剂盒测定蛋白浓度时,测得的浓度和我估计的浓度相差那么多呢?
最佳答案
- 五星知识达人网友：猎心人
- 2021-02-02 16:00
配置的BSA？是称取的固体配置的吗？
可能是配置的时候出现了误差，配置不精确。
BCA 受反应温度和反应时间影响较大，可能是反应时间还不够追问我的错没表达清楚，是我的样品测出来的和我估计的浓度相差太大，标准曲线还是在0.99以上的追答建议你先用SDS-PAGE的方法大致确认你的样品浓度
比如使用确定浓度的BSA(1mg/ml)和你的样品(Xmg/ml)保持同一上样量一起跑，如果条带跑出来差不多大小，那你的样品就应该在1mg/ml左右。
然后再去用BCA检测浓度，如果测出来和估计值偏差较大，那么就证明BCA并不适合检测该样品。
可以换用Bradford法或者Lowry法检测。
可能是配置的时候出现了误差，配置不精确。
BCA 受反应温度和反应时间影响较大，可能是反应时间还不够追问我的错没表达清楚，是我的样品测出来的和我估计的浓度相差太大，标准曲线还是在0.99以上的追答建议你先用SDS-PAGE的方法大致确认你的样品浓度
比如使用确定浓度的BSA(1mg/ml)和你的样品(Xmg/ml)保持同一上样量一起跑，如果条带跑出来差不多大小，那你的样品就应该在1mg/ml左右。
然后再去用BCA检测浓度，如果测出来和估计值偏差较大，那么就证明BCA并不适合检测该样品。
可以换用Bradford法或者Lowry法检测。
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