mRNA反转录形成cDNA 大致分为哪些步骤

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解决时间 2021-02-18 14:44

提问者网友：心如荒岛囚我终老
2021-02-18 09:36

最佳答案

五星知识达人网友：平生事
2021-02-18 10:45

mRNA反转录形成cDNA 大致分为哪些步骤
　　有反转录酶，可以以RNA为模版合成DNA。
　　这过程需要引物，根据mRNA有3‘polyA尾巴的特点,可以用oligo-dT作为引物，合成cDNA,这样可以自然去除非mRNA的RNA的转录。
　　也可以用随机引物去合成大量不同的cDNA。
　　如果要反转录特定的mRNA，就根据它设计特异性引物反转录，这样理论上只有目的cDNA产生。

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1楼网友：大漠
2021-02-18 11:30

先从细胞提取总rna，然后根据大多数真核mrna含有多聚腺嘌呤（polyadenylic acid ,polya）尾的特点，用寡聚dt纤维素柱将mrna分离出，以mrna为模板，在多聚a尾上结合12－18个dt的寡聚dt片段，作为合适的起始引物，在逆转录酶作用下合成

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