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为什么我的小鼠脑部冰冻切片全是洞呀,谁能救救我

答案:2  悬赏:20  手机版
解决时间 2021-03-30 08:44
  • 提问者网友:雨不眠的下
  • 2021-03-29 11:06
为什么我的小鼠脑部冰冻切片全是洞呀,谁能救救我
最佳答案
  • 五星知识达人网友:怀裏藏嬌
  • 2021-03-29 11:47
据我了解,应该是你脱水不充分,导致水残留,冰冻时候水形成结晶,融化后变成空洞。一般较大组织建议梯度脱水,先10%脱水,下沉后在转入15%,最后30%。我自己用的小鼠,直接30%,不过我用的溶液量较大。未发现空洞。个人经验,仅供参考。
全部回答
  • 1楼网友:往事隔山水
  • 2021-03-29 13:16
我一直做冰冻切片,尼氏染色,你所说的问题根源在于固定液和蔗糖液配置,一定要用PH7.4 PBS配置固定液和蔗糖液。用非PBS固定和沉糖会破坏膜结构,所以是造成空洞状的根源。另外在冰冻切片时,要掌握好温度,不易过低或过高,靠经验(可以拿普通鼠做)积累好技术,再做转基因鼠切片。
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