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western blot实验怎么上样

答案:1  悬赏:50  手机版
解决时间 2021-07-28 11:00
  • 提问者网友:兔牙战士
  • 2021-07-28 07:57
western blot实验怎么上样
western blot实验怎么进行上样呢?就是每个孔该加些什么,因为从来没接触过这个实验,所以很迷茫呀!
最佳答案
  • 五星知识达人网友:神的生死簿
  • 2021-07-28 08:03

首先要设计上样的顺序,一般是让与抗体有反应的样品和没有反应的样品间隔开,这样条带之间反差比较明显.比如你的检测样能够与抗体反应,上样就是maker—阳性对照—阴性对照—检测样(N个),如果检测样比较多,可以在检测样后再加上一个阴性对照和阳性对照.
上样量一般5-20微升(样品与上样buffer混合后),可以先做个普通的染色,看看条带有没有溢出,如果溢出了就上少点,太浅就上多点.
都调整好了再继续做转印.
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