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pET28a双酶切后连接目的基因,什么也不长

答案:1  悬赏:0  手机版
解决时间 2021-04-03 21:51
  • 提问者网友:动次大次蹦擦擦
  • 2021-04-03 18:54
pET28a双酶切后连接目的基因,什么也不长
最佳答案
  • 五星知识达人网友:想偏头吻你
  • 2021-04-03 19:23
pET28a双酶切后连接目的基因什么也不长可以考虑对DNA进行定量。

一般来说,设计一个连接反应,载体量最少需要50~100ng,而外源片段的分子数是载体分子数的3~10倍(具体质量取决于你的载体或外源片段的大小)。连接体系为10ul,转化时用一半(5ul)转化50ul感受态细胞(最好用购买的感受态细胞,感受态的效率有保证),留下另一半备用。
最好设置各种对照,以方便分析失败的原因,包括空载体连接对照等。
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