扩培时直接加入了IPTG 会怎么样

答案:2 悬赏:70 手机版

解决时间 2021-02-27 15:45

提问者网友：星軌
2021-02-27 08:58

头天晚上在试管中活化菌种，第二天上午将菌种转入大三角瓶中扩培，本应该是30℃培养4-6个小时至菌体到达一定浓度后再加IPTG，但是错误的在扩培的一开始就将IPTG加到大三角瓶中了，这样的话，30℃6个小时接着再20℃24h，能否诱导出蛋白？

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五星知识达人网友：归鹤鸣
2021-02-27 09:26

也可以诱导出蛋白，本人曾经在实验中也遇到过类似情况。

IPTG之所以在诱导阶段加入，目的在于尽量减少大量表达蛋白（通常需要表达的蛋白也是工程菌所不需要的）对菌体生长的影响，便于较早达到所需菌体浓度，利于诱导阶段大量表达蛋白。题主提到的这个问题，一般来说可能会对菌体的生长速度产生影响，某些较敏感的蛋白有可能会形成包涵体，或是浓度有所变化，但是表达出蛋白应该是没问题的。

不过建议提蛋白时候最好检测一下，如果浓度或是可溶性不合要求尽早弃掉，重新诱导以免影响实验。

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1楼网友：笑迎怀羞
2021-02-27 11:01

搜一下：扩培时直接加入了IPTG 会怎么样

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