永发信息网

为了从动物组织中提取纯净的DNA,首先要快速、有效地消化裂解动物组织细胞。消化裂解动物组织常用的方法有蛋白酶(如蛋白酶K)水解、表面活性剂处理、变性剂处理等。某科研人员拟使用加酶洗

答案:2  悬赏:60  手机版
解决时间 2021-03-08 04:44
  • 提问者网友:未信
  • 2021-03-07 11:13
为了从动物组织中提取纯净的DNA,首先要快速、有效地消化裂解动物组织细胞。消化裂解动物组织常用的方法有蛋白酶(如蛋白酶K)水解、表面活性剂处理、变性剂处理等。某科研人员拟使用加酶洗衣粉消化裂解猪肌肉样本,并提取猪的DNA。实验步骤如下:
①取500mg剪碎的猪肌肉组织于离心管中,加40mg加酶洗衣粉和1.5mL超纯水混合,在一定温度条件下水浴消化24h。
②加入苯酚、氯仿、异丙醇(25:24:1)混合液抽提。
③加0.2mg/mL的RNA水解酶于37。C水浴th。
④加醋酸钠和无水乙醇,4cc高速离心15min。
⑤用70qo乙醇洗涤沉淀两次,风干,得到高纯度的DNA。
请回答有关问题:
(1)加酶洗衣粉可以消化裂解动物组织细胞的原理是 。
(2)步骤②的目的是  。步骤③的目的是  。
(3)步骤④中使用无水乙醇的目的是  ,高速离心时温度保持在4℃的原因有  、  等。
(4)如果要将加酶洗衣粉法提取DNA与蛋白酶K法提取DNA的效果进行对比,请简要说明实验设计思路。  。
(5)若是从血细胞中提取DNA,则选择  (选填“鸡血”或“哺乳动物红细胞”)。破碎细胞时,向血细胞液中加入一定量的  ,同时用玻璃棒搅拌,过滤后收集滤液即可。
最佳答案
  • 五星知识达人网友:杯酒困英雄
  • 2021-03-07 12:37
(答案→) 解析:(1)细胞膜被破坏可导致细胞裂解,由于细胞膜中含有蛋白质,所以蛋白酶可以促进细胞裂解,另外,表面活性剂也可以破坏细胞膜。(2)苯酚、氯仿、异丙醇混合液可以促进蛋白质变性,便于抽提;RNA水解酶可以水解RNA。(3)DNA在无水乙醇中的溶解度很低,利用无水乙醇可以析出纯度更高的DNA;高速离心时要保持低温,原因是:可以降低水解酶的活性,防止DNA被水解;还可以降低分子运动,易于形成沉淀析出。(4)实验目的是研究蛋白酶K提取DNA的效果,因此应将上述实验中的加酶洗衣粉换成蛋白酶K,其他实验步骤相同,得到DNA后,测定DNA的量、纯度。(5)因为哺乳动物的成熟的红细胞无细胞核,不能提取出DNA分子,因此应选用鸡血;破碎细胞时,可以加入一定量的蒸馏水,细胞会吸水涨破,内容物流出。
全部回答
  • 1楼网友:雾月
  • 2021-03-07 13:13
我好好复习下
我要举报
如以上回答内容为低俗、色情、不良、暴力、侵权、涉及违法等信息,可以点下面链接进行举报!
点此我要举报以上问答信息
大家都在看
推荐资讯