大片段的RT-PCR

大片段的RT-PCR

博凌科为-为你解答：Takara LA Taq酶，体系同说明书。反应程序是：（要求引物Tm值在70度左右，但上下只能浮动2度。Primer 5计算） No. of Cycles Temperature (℃) Duration 1 94 3 min 5 94 30 sec 72 3 min 5 94 30 sec 70 30 sec 72 3 min 25 94 30 sec 68 30 sec 72 3 min 1 72 5 min 1 4 10 min

不知道你要用来做什么，简单知道的说一下
1. 5.5kb的产物长度正常的TAQ都可以扩增，延伸时间加长，一般的来说1.5 kb 1 分钟，其实不止，你可以试试计算一下，或者看看你使用的酶的说明书，我们这里的酶是自己实验室做的，所以都是经验之谈。
2 实在不行，你可以用一下LA酶 说明书上有操作方法，我用LA扩增10kb的东西，没问题，就是载体不好连接，多试试。
3 T基本上能满足你连接测序的要求了。

北京德元国际科技可以做RT-PCR,代做就可以了

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