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pet28a是为包涵体表达而设计的吗

答案:1  悬赏:10  手机版
解决时间 2021-04-02 02:54
  • 提问者网友:我没有何以琛的痴心不悔
  • 2021-04-01 04:11
pet28a是为包涵体表达而设计的吗
最佳答案
  • 五星知识达人网友:动情书生
  • 2021-04-01 04:44
检测原核表达蛋白不需要将菌体超声波破碎的,原因如下:
1、如果是仅仅检测原核蛋白是否有表达,可以直接将菌体重悬于蒸馏水中,并使用SDS-PAGE的方法检测。
2、如果需要检测原核蛋白是否有可溶表达,则需要将菌体超声波破碎之后再检测是否有可溶表达。
3、所以检测原核表达蛋白不需要将菌体超声波破碎的。
超声法破碎细胞提蛋白质的具体步骤:
1、清洗后的的组织用搅切机切碎成小块,混悬在至少两倍体积的缓冲液内;
2、洗去培养液的细胞,混悬在至少两倍体积的缓冲液中;
3、将超声探头没入混悬液内,进行超声破碎,一般总超声时间约2min,分为几个周期,如4×30s,周期之间让样品在冰浴中冷却,总的过程不用加裂解液。
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