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如何选择过表达载体

答案:2  悬赏:70  手机版
解决时间 2021-12-29 21:40
  • 提问者网友:趣果有间
  • 2021-12-28 23:33
拟过表达某蛋白,过表达载体选择有无原则?
最佳答案
  • 五星知识达人网友:七十二街
  • 2021-12-29 01:07
和一般的表达载体相比,最重要的是要有强启动子
全部回答
  • 1楼网友:躲不过心动
  • 2021-12-29 01:41
首先,你得先确定这个3.4kb的基因是需要在原核还是真核表达系统中表达; 其次,选择好相对应的表达系统后,再考虑这段基因的表达产物(即蛋白)最后是否需要附加上标签(tag)以用于后续的分离纯化,以及这个标签是加在c末端还是n末端等。 最后,根据你的实验目的确定你所需要的表达量,是采用一个含有强启动子的载体来过量表达蛋白,还是只需要一个普通的启动子即可。 我建议你先根据上述原则初选出一些载体,然后找到这些载体的使用说明书(直接在网上找),里面有非常详细的说明,包括启动子信息、多克隆位点信息、载体使用范围、表达条件等。
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