做实时定量PCR需要校正内参吗
答案:1 悬赏:40 手机版
解决时间 2021-11-25 15:45
- 提问者网友：
- 2021-11-25 03:59
做实时定量PCR需要校正内参吗
最佳答案
- 五星知识达人网友：逃夭
- 2021-11-25 05:21
既然你半定量就把内参校正好了，好做什么Real-time PCR，直接用半定量的结果就可以说明问题了。
显然，我的做法是首先半定量确定引物的特异性（单一条带，亮）
其次，根据提取RNA的浓度，大致保证反转录后所有的样品浓度较为一致，也可以核酸测定仪准确确定浓度
第三，Real-time PCR后将样品减去内参的Ct值，内参本来就是消除误差的。
显然，我的做法是首先半定量确定引物的特异性（单一条带，亮）
其次，根据提取RNA的浓度，大致保证反转录后所有的样品浓度较为一致，也可以核酸测定仪准确确定浓度
第三，Real-time PCR后将样品减去内参的Ct值，内参本来就是消除误差的。
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