质粒DNA的提取过程中加入酚:氯仿:异戊醇的目的是什么
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解决时间 2021-01-08 07:47
- 提问者网友:半生酒醒
- 2021-01-07 13:48
质粒DNA的提取过程中加入酚:氯仿:异戊醇的目的是什么
最佳答案
- 五星知识达人网友:怙棘
- 2021-01-07 15:21
酚:氯仿:的目的是沉淀蛋白质原理如下:
酞与氯仿是非极性分子,水是极性分子,当蛋白水溶液与酚或氯仿混合时,蛋白质分子之间的水分子就被酚或氯仿挤去,使蛋白失去水合状态而变性过离心,变性蛋白质的密度比水的密度为大,因而与分离,沉淀在水相下面,从而与溶解在水相中的DNA分开。
水相异戊醇的目的是减少抽提过程中的泡沫产生,原理如下:
在抽提DNA时,为了混合均匀,必须剧烈振荡容器数次,这时在混合液内易产生气泡,气泡会阻止相互间的充分作用。加入异戊醇能降低分子表面张力,所以能减少抽提过程中的泡沫产生。
酞与氯仿是非极性分子,水是极性分子,当蛋白水溶液与酚或氯仿混合时,蛋白质分子之间的水分子就被酚或氯仿挤去,使蛋白失去水合状态而变性过离心,变性蛋白质的密度比水的密度为大,因而与分离,沉淀在水相下面,从而与溶解在水相中的DNA分开。
水相异戊醇的目的是减少抽提过程中的泡沫产生,原理如下:
在抽提DNA时,为了混合均匀,必须剧烈振荡容器数次,这时在混合液内易产生气泡,气泡会阻止相互间的充分作用。加入异戊醇能降低分子表面张力,所以能减少抽提过程中的泡沫产生。
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- 1楼网友:持酒劝斜阳
- 2021-01-07 15:41
除去蛋白质、脂类等杂质。
- 2楼网友:笑迎怀羞
- 2021-01-07 15:28
目的是纯化DNA啦~氯仿可使蛋白质变性并有助于液相与有机相的分离,而异戊醇则有助于消除抽提过程中出现的气泡。
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