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知道蛋白质的分子量和等电点,如何纯化处理(分子质量为80kd,pl=6.3)

答案:2  悬赏:10  手机版
解决时间 2021-03-07 23:41
  • 提问者网友:遮云壑
  • 2021-03-07 18:03
不胜感激!我应该用那种纯化蛋白质 的方法呢?
最佳答案
  • 五星知识达人网友:七十二街
  • 2021-03-07 18:49
单单知道这两点还是不太够的。

通常的分子筛或者超滤的分辨率都不是很高,特别是在80 kDa左右。反而有一些小肽使用超滤会有好的结果。知道等电点的话,对于离子交换层析会有一定帮助,但是也不是绝对的。楼主看来没有这方面的积累。

不过现在的纯化方法最为常用的都是亲和层析,只要将蛋白在表达体系中加上Tag之类的,就很方便了。如果是从组织中提取的话,需要样品的量会比较多,同时还需要建立一定的测活系统(如果有的话),没有测活方法而样品又很少,只能祝福你了!希望运气足够好,能找到方便的条件。
全部回答
  • 1楼网友:刀戟声无边
  • 2021-03-07 19:13
已知分子量可以做分子筛层析或超滤,利用等电点可以做等电点电泳或等电点沉淀。 如果你的蛋白不怕有机溶剂,可以先调等电点,作有机溶剂沉淀,再做分子筛。 再看看别人怎么说的。
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