western 跑胶上样问题
答案:1 悬赏:70 手机版
解决时间 2021-02-23 23:25
- 提问者网友:人生佛魔见
- 2021-02-23 11:46
western 跑胶上样问题
最佳答案
- 五星知识达人网友:一叶十三刺
- 2021-02-23 13:08
非常不建议你这样上样!
如果你两次上样的样品在浓缩胶里面没有汇合到一起的话,你跑出来的样用抗体孵育就很可能出现两条条带,根本没法比较大小。
我一般上样都在10~20ul左右,完全没问题。不知道你怎么要上这么多……追问我们一般取15ul样品,加10ul loading。跑完了,前面我用60v,20分钟左右跑到一条线上换了80v,跑上分离胶大概1cm左右了追答25ul确实有点多,但每个人的样本都不一样的,我们是直接用loading buffer裂解细胞,上15ul左右,也就不用再混loading和样品了。 如果你浓缩胶够长的话也可能跑到一起去,但结果我真不好说追问我明天看看结果吧 。。。
如果你两次上样的样品在浓缩胶里面没有汇合到一起的话,你跑出来的样用抗体孵育就很可能出现两条条带,根本没法比较大小。
我一般上样都在10~20ul左右,完全没问题。不知道你怎么要上这么多……追问我们一般取15ul样品,加10ul loading。跑完了,前面我用60v,20分钟左右跑到一条线上换了80v,跑上分离胶大概1cm左右了追答25ul确实有点多,但每个人的样本都不一样的,我们是直接用loading buffer裂解细胞,上15ul左右,也就不用再混loading和样品了。 如果你浓缩胶够长的话也可能跑到一起去,但结果我真不好说追问我明天看看结果吧 。。。
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