求助用反复冻融法裂解细胞的关键

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解决时间 2021-03-16 12:25

提问者网友：最爱你的唇
2021-03-15 20:32

求助用反复冻融法裂解细胞的关键

最佳答案

五星知识达人网友：街头电车
2021-03-15 21:22

反复冻融法裂解细胞：1、将细胞在-20度以下冰冻，室温融解，反复几次，由于细胞内冰粒形成和剩余细胞液的盐浓度增高引起溶胀，使细胞结构破碎。2、至少3次以上冻溶。3、IFCC推荐法：收集细胞悬液，4℃低温离心（3000rpm，5min），弃上清，加入一定量PBS（200ul），轻轻吹打混匀，-200C冷冻30min，370C解冻，如此反复3次，可形成细胞裂解液。4、用液氮冻融三四次就可以了，细胞冻住后，取出放37度水浴，溶解后震荡，再冻

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1楼网友：荒野風
2021-03-15 22:13

裂细胞核需要超声，反复冻融有些细胞核可能会破裂，但仅是很少数的细胞，细胞核不会裂解的很完全。

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