从组织提取western用蛋白,组织剪碎时一定要在冰上进行吗（加裂解液之前）？
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解决时间 2021-02-08 07:21
- 提问者网友：蓝琪梦莎
- 2021-02-07 20:15
从组织提取western用蛋白,组织剪碎时一定要在冰上进行吗（加裂解液之前）？
最佳答案
- 五星知识达人网友：妄饮晩冬酒
- 2021-02-07 21:55
根据我们实验室所用的实验手册，组织的粉碎使用的是臼和杵（非专业实验器具，市场买的陶瓷的），而且是加入液氮来降温，在液氮的浸泡中进行的。液氮蒸发极快，并不会跟裂解液混合。用冰块不能够很好的冷却。用剪刀剪也不能够很好的粉碎。
不过如果楼主需要的蛋白在所取组织中大量表达，该蛋白本身较为稳定，楼主所需的量又不多，在冰上剪碎也不是不行，应该也提取得到。理论上组织离体之后就不应该暴露在室温，对于蛋白质的保存温度越低越好，所以建议楼主从剪碎到裂解液之后全程都要使用冰块。
不过如果楼主需要的蛋白在所取组织中大量表达，该蛋白本身较为稳定，楼主所需的量又不多，在冰上剪碎也不是不行，应该也提取得到。理论上组织离体之后就不应该暴露在室温，对于蛋白质的保存温度越低越好，所以建议楼主从剪碎到裂解液之后全程都要使用冰块。
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- 1楼网友：梦中风几里
- 2021-02-07 23:13
应该不行吧。
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