用M9培养大肠杆菌，培养好后，培养基是什么颜色的
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- 提问者网友：我一贱你就笑
- 2021-01-06 08:42
用M9培养大肠杆菌，培养好后，培养基是什么颜色的
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- 五星知识达人网友：独行浪子会拥风
- 2021-01-06 09:32
用M9培养大肠杆菌，培养好后，培养基是什么颜色的
用于大肠杆菌的液体培养基：
GYT培养基（Tung and Chow 1995）
10%(v/v)甘油
0.125%(m/v)酵母提取物
0.25%(m/v)胰化蛋白胨
使用0.22um滤器过滤除菌，分装成2.5ml一份，保存于4℃。
LB（Luria-Bertani）培养基
配制每升培养基，应在950ml去离子水中加入：
胰化蛋白胨 10g
酵母提取物 5g
NaCl 10 g
摇动容器直至溶质溶解。用5mol/L NaOH(约0.2ml)调pH值至7.0。用去离子水定容至1L。在15psi(1.05kg/cm2)高压下蒸汽灭菌20min。
M9培养基
配制1L培养基，应在750m1无菌去离子水(冷至50℃或50℃以下)中加入：
5×M9盐溶液 200ml
1 mol/LMgSO4 2 ml
适当碳源的20%溶液(如20%葡萄糖) 20ml
1 mol/LCaCl2 0.1 ml
灭菌的去离子水至980ml。
如果需要，可在M9培养基中补加适当氨基酸和维生素的贮存液。
5×M9盐溶液配制：用无离子水溶解下列盐类，终体积为1L：
Na2HPO4·7H2O 64g
KHPO4 15g
NaCl 2.5g
NH4Cl 5.0g
分装成200ml一份，在15psi(1.05kg/cm2)高压下蒸汽灭菌15min。
分别配制MgSO4溶液和CaCl2溶液，高压灭菌。用无菌水将5×M9盐溶液稀释至980ml后，加入MgSO4和CaCl2溶液。葡萄糖溶液在加到稀释的M9盐溶液之前，用0.22um滤器过滤除菌。当使用含有染色体上脯氨酸生物合成操纵子缺陷[△(lac-proAB)]的大肠杆菌以及互补的proAB基因在F'质粒上时，在M9基本培养基中补加下列成分：
0.4%(m/v)葡萄糖(右旋糖)
5mM MgSO4·7H2O
0.01%硫胺
NZCYM培养基
配制每升培养基，在950ml去离子水中加入：
NZ胺 10g
NaCl 5g
酵母提取物 5g
酪蛋白水解物 1g
MgSO4·7H2O 2g
摇动容器直至溶质完全溶解。用5mol/L NaOH(约0.2ml)调pH值至7.0。用去离子水定容至1L。
在15psi(1.05kg/cm2)高压下蒸汽灭菌20min。
NZ胺：酪蛋白酶促水解物(ICN Biochemicals公司)。
NZCYM、NZYM和NZM也可用BD Biscienses公司的脱水培养基。
NZYM培养基
NZYM培养基除不含酪蛋白水解物外，其他成分与NZCYM培养基相同。
NZM培养基
NZM培养基除不含酵母提取物外，其他成分与NZYM培养基相同。
SOB培养基
配制每升培养基，在950ml去离子水中加入：
胰化蛋白胨 20g
酵母提取物 5g
NaCl 0.5 g
摇动容器使溶质完全溶解。加10ml 250mmol／L KCl溶液(将1.86g KCl用100ml去离子水溶解即配成250mmol/l KCl溶液)。用5mol/L NaOH调pH值至7.0。用去离子水定容至1L。在15 psi(1.05kg／cm2)高压下蒸汽灭菌20min。该溶液在使用前，加入5ml灭菌的2 mol/l MgCl2[2mol／L MgCl2溶液的配制方法如下：用90ml去离子水溶解19g MgCl2，用去离子水调整体积为100ml，在15psi(1.05kg／cm2)高压下蒸汽灭菌20min]。
SOC培养基
SOC培养基除含有20mmol／L葡萄糖外，其他成分与SOB培养基相同。SOB培养基经高压灭菌后冷至60℃或60℃以下，加20ml除菌的1mol／L葡萄糖溶液(1mol/l葡萄糖溶液的配制方法是：用90ml去离子水溶解18g葡萄糖，完全溶解后，用去离子水定容至100ml，用0.22um滤器过滤除菌)。
Terrific肉汤(又称TB培养基，Tartof and Hobbs 1987)
配制每升培养基，在900ml去离子水中加入：
胰化蛋白胨 12g
酵母提取物 24g
甘油 4ml
摇动容器使溶质完全溶解。然后在15psi(1.05 kg／cm2)高压下蒸汽灭菌20min。当溶液冷至60℃或60℃以下时加入100ml无菌的0.17mol/L KH2PO4，0.72mol/L K2HPO4溶液[该溶液的配制方法是：用90ml去离子水溶解2.31g KH2PO4和12.54g K2HPO4，完全溶解后，用去离子水定容至100ml并在15psi(1.05kg／cm2)高压下蒸汽灭菌20min。
2×YT培养基
配制每升培养基，在900ml去离子水中加入：
胰化蛋白胨 16g
酵母提取物 10g
NaCl 5g
摇动容器直至溶质溶解，用5N NaOH调pH值至7.0，用去离子水定容至1L。在15psi(1.05kg／cm2)高压下蒸汽灭菌20min。
用于大肠杆菌的液体培养基：
GYT培养基（Tung and Chow 1995）
10%(v/v)甘油
0.125%(m/v)酵母提取物
0.25%(m/v)胰化蛋白胨
使用0.22um滤器过滤除菌，分装成2.5ml一份，保存于4℃。
LB（Luria-Bertani）培养基
配制每升培养基，应在950ml去离子水中加入：
胰化蛋白胨 10g
酵母提取物 5g
NaCl 10 g
摇动容器直至溶质溶解。用5mol/L NaOH(约0.2ml)调pH值至7.0。用去离子水定容至1L。在15psi(1.05kg/cm2)高压下蒸汽灭菌20min。
M9培养基
配制1L培养基，应在750m1无菌去离子水(冷至50℃或50℃以下)中加入：
5×M9盐溶液 200ml
1 mol/LMgSO4 2 ml
适当碳源的20%溶液(如20%葡萄糖) 20ml
1 mol/LCaCl2 0.1 ml
灭菌的去离子水至980ml。
如果需要，可在M9培养基中补加适当氨基酸和维生素的贮存液。
5×M9盐溶液配制：用无离子水溶解下列盐类，终体积为1L：
Na2HPO4·7H2O 64g
KHPO4 15g
NaCl 2.5g
NH4Cl 5.0g
分装成200ml一份，在15psi(1.05kg/cm2)高压下蒸汽灭菌15min。
分别配制MgSO4溶液和CaCl2溶液，高压灭菌。用无菌水将5×M9盐溶液稀释至980ml后，加入MgSO4和CaCl2溶液。葡萄糖溶液在加到稀释的M9盐溶液之前，用0.22um滤器过滤除菌。当使用含有染色体上脯氨酸生物合成操纵子缺陷[△(lac-proAB)]的大肠杆菌以及互补的proAB基因在F'质粒上时，在M9基本培养基中补加下列成分：
0.4%(m/v)葡萄糖(右旋糖)
5mM MgSO4·7H2O
0.01%硫胺
NZCYM培养基
配制每升培养基，在950ml去离子水中加入：
NZ胺 10g
NaCl 5g
酵母提取物 5g
酪蛋白水解物 1g
MgSO4·7H2O 2g
摇动容器直至溶质完全溶解。用5mol/L NaOH(约0.2ml)调pH值至7.0。用去离子水定容至1L。
在15psi(1.05kg/cm2)高压下蒸汽灭菌20min。
NZ胺：酪蛋白酶促水解物(ICN Biochemicals公司)。
NZCYM、NZYM和NZM也可用BD Biscienses公司的脱水培养基。
NZYM培养基
NZYM培养基除不含酪蛋白水解物外，其他成分与NZCYM培养基相同。
NZM培养基
NZM培养基除不含酵母提取物外，其他成分与NZYM培养基相同。
SOB培养基
配制每升培养基，在950ml去离子水中加入：
胰化蛋白胨 20g
酵母提取物 5g
NaCl 0.5 g
摇动容器使溶质完全溶解。加10ml 250mmol／L KCl溶液(将1.86g KCl用100ml去离子水溶解即配成250mmol/l KCl溶液)。用5mol/L NaOH调pH值至7.0。用去离子水定容至1L。在15 psi(1.05kg／cm2)高压下蒸汽灭菌20min。该溶液在使用前，加入5ml灭菌的2 mol/l MgCl2[2mol／L MgCl2溶液的配制方法如下：用90ml去离子水溶解19g MgCl2，用去离子水调整体积为100ml，在15psi(1.05kg／cm2)高压下蒸汽灭菌20min]。
SOC培养基
SOC培养基除含有20mmol／L葡萄糖外，其他成分与SOB培养基相同。SOB培养基经高压灭菌后冷至60℃或60℃以下，加20ml除菌的1mol／L葡萄糖溶液(1mol/l葡萄糖溶液的配制方法是：用90ml去离子水溶解18g葡萄糖，完全溶解后，用去离子水定容至100ml，用0.22um滤器过滤除菌)。
Terrific肉汤(又称TB培养基，Tartof and Hobbs 1987)
配制每升培养基，在900ml去离子水中加入：
胰化蛋白胨 12g
酵母提取物 24g
甘油 4ml
摇动容器使溶质完全溶解。然后在15psi(1.05 kg／cm2)高压下蒸汽灭菌20min。当溶液冷至60℃或60℃以下时加入100ml无菌的0.17mol/L KH2PO4，0.72mol/L K2HPO4溶液[该溶液的配制方法是：用90ml去离子水溶解2.31g KH2PO4和12.54g K2HPO4，完全溶解后，用去离子水定容至100ml并在15psi(1.05kg／cm2)高压下蒸汽灭菌20min。
2×YT培养基
配制每升培养基，在900ml去离子水中加入：
胰化蛋白胨 16g
酵母提取物 10g
NaCl 5g
摇动容器直至溶质溶解，用5N NaOH调pH值至7.0，用去离子水定容至1L。在15psi(1.05kg／cm2)高压下蒸汽灭菌20min。
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