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关于PMD-18载体及载体引物

答案:2  悬赏:50  手机版
解决时间 2021-03-28 21:52
  • 提问者网友:
  • 2021-03-28 07:56
在做蓝白斑筛选时,将目的片段与pMD18-T载体连接后转化到感受态细胞,再用载体引物扩增后的片段长度比之前的目的片段大多少?是怎么来的?谢谢!
最佳答案
  • 五星知识达人网友:酒安江南
  • 2020-12-16 17:31
一般是大小一致的,但是主要要看你的目的片段和引物有没有结合位点,要是有的话PCR的大小就不一定了!一般的载体引物都是扩多克隆位点之间的片段,不一样的引物的延伸长度不一定!最好的如果你的片段很大的话最好就是用自己的引物!建议加一步酶切验证,这样的话也可以双保险,如果酶切位点不好选择的话,可以用18Tsimple,然后PCR引物加你自己设计的酶切位点!
全部回答
  • 1楼网友:不想翻身的咸鱼
  • 2020-10-02 23:45
用这两种引物:bcabest sequencing primer m13-47和bcabest sequencing primer rv-m vector size (bp) 2692 cloning site 425 lacz α-peptide 146-475 ampicillin resistance gene 1632~2492 puc origin 873-1461 primer binding sites: bcabest sequencing primer m13-47 binding site 352-375 bcabest sequencing primer rv-m binding site 484-507
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