高效液相色谱中流动相常用的缓冲盐有哪些

高效液相色谱中流动相常用的缓冲盐有哪些

冲柱时间的长短，要看你的色谱柱。柱长决定流动相的缓冲时间。按照标准执行，需要冲10倍的柱体积。不过如果是研发做实验，通常会节省一些时间。250mm的长柱都是至少要冲色谱柱半个小时也就够了。反相色谱柱，比如C8和C18色谱柱会先用10%的甲醇水（或乙腈水）来过渡半小时，然后冲缓冲盐的流动相平衡进样。结束后用10%的甲醇水（或乙腈水）过渡半小时，然后用纯甲醇（或纯乙腈）保存色谱柱半小时。这样做的主要原因是，流动相中的缓冲盐不可以直接遭遇纯有机相。因为溶解度等原因，可能会出现盐析现象。所以会用甲醇水做过渡。你在冲流动相的时候可以观察基线，平衡后就可以进样分析。但是冲洗色谱柱的时候和基线没有关系。冲洗色谱柱主要是洗去色谱柱中残留的流动相和样品，避免他们对固定相，也就是你色谱柱的填料产生影响。

可以的。 很多反相色谱的流动相里面都有缓冲盐，但是需要注意几点： 一定要过滤，一个是确保盐物质溶解，一个是分析纯的盐里面有很多杂质，过滤干净才不会损害柱子。 含盐的流动相一定不要直接碰到纯的有机溶剂。就是说色谱柱里面如果是纯甲醇，用10%的甲醇水过渡一下，然后在换成流动相。因为盐在水中溶解性很好，在纯有机相里面溶解度很差，容易析晶。如果析出的晶体黏在柱子或者仪器管路里面就完蛋了。 每天用完一定要拿10%的甲醇水或者10%的乙腈水冲洗，1.0ml/min的流速至少30min。不光是为了过渡有机相，也是为了不让盐留在柱子里面。

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