几种柱层析的特点和在纯化工艺中的选择

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解决时间 2021-02-01 09:16

提问者网友：wodetian
2021-01-31 08:54

几种柱层析的特点和在纯化工艺中的选择

最佳答案

五星知识达人网友：归鹤鸣
2021-01-31 10:06

分享到：收藏推荐在过去的三十年中,分离生物大分子的各种技术和方法得到了不断的发展.随着各种介质的完善和商品化,使以填料为核心的柱层析技术在蛋白质等粗提后的纯化中起到了重要作用.本文在一定范围内,仅就其中几种最常用柱层析的特点和在纯化中的选择应用作一综述.一、几种柱层析的特点1凝胶过滤柱层析(ＧｅｌＦｉｌｔｒａｔｉｏｎＣｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ,ＧＦＣ)ＧＦＣ是以分子大小和形状为分离基础的.具体说就是利用不同大小分子通过凝胶滞留时间的差别来分离混合物的柱层析方法.另外一种说法是分离是以分子体积的大小为基础的,分子体积即分子溶剂化后的体积,受分子形状和相对分子质量两方面因素的影响.有时加入变性剂(尿素、盐酸胍等)以破坏蛋白质的三、四级结构,可以使分离主要受控于相对分子质量的大小.ＧＦＣ特别适用于分离相对分子质量大于2000的高分子化合物和相对分子质量差异大的混合物及低聚物.ＧＦＣ的分离不依赖于流动相和固定相的相互作用,所以不必使用梯度洗脱.但是由于电荷屏蔽的因素,为了降低填料与生物分子之间的相互作用,往往会适当提高盐浓度,至少高于005ｍｏｌ/ＬＮａＣｌ.

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1楼网友：千杯敬自由
2021-01-31 10:43

感谢回答，我学习了

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