Western Blot为什么必须要用内参
答案:2 悬赏:20 手机版
解决时间 2021-01-24 21:11
- 提问者网友：我没有何以琛的痴心不悔
- 2021-01-24 13:18
Western Blot为什么必须要用内参
最佳答案
- 五星知识达人网友：忘川信使
- 2021-01-24 14:34
在SDS-PAGE电泳前，一般样品加入上样缓冲液中并煮沸5~10分钟，让蛋白样品变性并带上一定电荷，使蛋白迁移速度只与分子量相关，这样才能将不同的蛋白通过电泳尽量的区分开来。这个过程中，会打断一些分子间的相互作用，包括抗体和蛋白样品间的相互作用，也许是没人这么做的原因。
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- 1楼网友：狂恋
- 2021-01-24 16:13
其实内参不是必定需要的。如果只要检测是否表达就不需要内参只要阳性对照。相反，如果需要定量的话就必须要用内参，主要是两大作用，1：因为内参一般都是表达量比较恒定的管家基因，所以可以将目的与内参的灰度值作比给目的定量，2：通过内参条带的形状看提取的蛋白质是否有降解
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