两种酶的反应缓冲液不一样，做双酶切时如何处理？

答案:3 悬赏:10 手机版

解决时间 2021-02-12 07:15

提问者网友：嘚啵嘚啵
2021-02-12 03:31

最佳答案

五星知识达人网友：像个废品
2021-02-12 04:31

如果是分开酶切的话，第一个酶切完成后要回收（可用醇回收，效率比较高）后，再进行第二次酶切。
你可以尝试双酶切，buffer 就选星活性一致的或者最接近的。
本人建议你使用后者，双酶切。因为你单酶切后回收有损失。双酶切效果还是不错的。
而且双酶切的话一般有通用buffer ，可以对照buffer通用表找到两个酶的最佳buffer 。
附上通用表：

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1楼网友：平生事
2021-02-12 05:19

没有公用buffer的话，比较麻烦，你只有先做个单切，然后再回收回来，再用另外一种酶切下。也就是所说的分步酶切。除此之外没有其他任何办法！你用的是哪个公司的酶？一般该公司都会出个酶的buffer表的。你依据那个表查就可以了，如果你是用NEB的酶，告诉我酶切位点我可以帮你查下。takara的也行！

2楼网友：刀戟声无边
2021-02-12 04:48

查一下各自在不同buffer中的活性，尽量选择双方都有高活性的buffer追问在不同buffer中的活性哪里能查到，第一次接触，不太了解，谢谢

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