质粒可以去磷酸化为什么目的片段不可以
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解决时间 2021-01-25 01:10
- 提问者网友：趣果有间
- 2021-01-24 21:06
质粒可以去磷酸化为什么目的片段不可以
最佳答案
- 五星知识达人网友：第四晚心情
- 2021-01-24 21:16
质粒去磷酸化是为了防止模板自连，但5'端的磷酸基团对于DNA连接是必须的，而目的基因片段两端是有5'端的磷酸基团的，可以保证DNA连接酶的作用下与载体连接。
碱性磷酸酶可以去除DNA断裂处的5'端的磷酸基团。
碱性磷酸酶可以去除DNA断裂处的5'端的磷酸基团。
全部回答
- 1楼网友：上分大魔王
- 2021-01-24 22:18
主要是防止质粒载体的自身连接，最常用于质粒进行平端连接时。
去磷酸化是由于，dna连接酶催化dna连接时需要有磷酸基团的存在，载体在经酶切后会在切点端保留一个磷酸基团。
此时如果不进行去磷酸化处理，在后续连接反应中载体自身会优先进行连接，你的目的片段可能就无法插入。
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