的目的基因双酶切不纯化可以进行连接吗（双
答案:1 悬赏:40 手机版
解决时间 2021-11-15 13:24
- 提问者网友：呐年旧曙光
- 2021-11-14 23:15
的目的基因双酶切不纯化可以进行连接吗（双
最佳答案
- 五星知识达人网友：天凉才是好个秋
- 2021-11-14 23:48
不可以。
首先，采用的是质粒模板；
其次，扩增得到的非单一条带，如果不纯化直接酶切，那么得到的将是带有相应酶切位点的几种片段，继续试验的话，菌落PCR鉴定时可能会出现几种不同大小的条带。
第三、PCR产物里面缓冲液并不是合适的酶切缓冲液，会极大的影响酶切的效率。甚至于根本就切不开，即便是隔夜酶切也不可以。
首先，采用的是质粒模板；
其次，扩增得到的非单一条带，如果不纯化直接酶切，那么得到的将是带有相应酶切位点的几种片段，继续试验的话，菌落PCR鉴定时可能会出现几种不同大小的条带。
第三、PCR产物里面缓冲液并不是合适的酶切缓冲液，会极大的影响酶切的效率。甚至于根本就切不开，即便是隔夜酶切也不可以。
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