EMSA实验为何需要设置许多组对照实验？目的何在？

答案:2 悬赏:10 手机版

解决时间 2021-01-26 14:24

提问者网友：你独家记忆
2021-01-25 22:57

EMSA实验1,阴性对照反应(标记探针)；2,常规反应(含激活的目的转录因子的核蛋白＋标记探针)；3,探针冷竞争反应(含激活的目的转录因子的核蛋白＋标记探针＋标记探针100倍量的未标记探针)；4,突变探针的冷竞争反应(含激活的目的转录因子的核蛋白＋标记探针＋标记探针100倍量的未标记突变探针)；5,Super-shift反应(含激活的目的转录因子的核蛋白＋标记探针＋目的转录因子的特异抗体)。

最佳答案

五星知识达人网友：时间的尘埃
2021-01-25 23:22

每个对照组的目的：
1. 看光有探针，没有其他成分时，探针的位置，应该位于最下方。不然说明探针里面有杂质，影响电泳
2. 这个是看蛋白和探针的结合，是实验目的
3. 看探针结合的特异性。如果冷探针可以竞争结合，阻碍了标记的探针，说明2中的结合是特异的
4. 目的和3相同。突变的冷探针应该对2的结果没有影响
5. 也是判断特异性，这次是看蛋白的特异性，和抗体结合后，就会有super-shift。如果没有，说明是其他的蛋白结合。

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1楼网友：十鸦
2021-01-25 23:47

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