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求文献翻译,急求

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解决时间 2021-03-03 01:04
  • 提问者网友:眉目添风霜
  • 2021-03-02 07:58
To define the unique molecular properties of TRF2 that are involved in end protection, we performed a domain-swapping approach between TRF2 and the structurally similar but functionally divergent telomere-binding protein TRF1 (ref. 9; also known as TERF1). TRF2 and TRF1 are both composed of four domains: a carboxy-terminal MYB domain required for binding to double-stranded telomeric DNA (TTAGGG), a flexible hinge domain involved in protein–protein interaction, a TRFH domain required for homodimerization9 and a divergent amino-terminal domain (Fig. 1a). The N-terminal domain of TRF2 is rich in basic residues (basic domain), whereas the TRF1 N-terminal domain is composed of acidic residues (acidic domain) (Fig. 1a). We generated a set of chimaeric telomere repeat factors (TRFc) in which TRF2 domains were replaced by the analogous TRF1 domains. The resulting constructs were tested for their ability to complement for the loss of endogenous TRF2 using TRF2 conditional (Trf2floxed/floxed) mouse embryonic fibroblasts (MEFs)1. To ensure synchronous and complete TRF2 depletion we used Trf2floxed/floxed cells carrying an inducible Cre recombinase (Rosa26-CreERT2) that can be activated by 4-hydroxytamoxifen (Supplementary Fig. 1). All TRFc constructs analysed showed the expected telomere localization in the presence or absence of endogenous TRF2 (Supplementary Fig. 2a–
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  • 五星知识达人网友:酒安江南
  • 2021-03-02 08:23
定义TRF2,参与最后保护独特的分子特性,我们进行了一个结构域交换方法TRF2和结构相似但功能不同的端粒结合蛋白TRF1之间(参考文献9;也被称为TERF1)。TRF2和TRF1均由四个结构域:结合双链端粒DNA所需的羧基端结构域(TTAGGG),柔性铰链结构域参与蛋白质–蛋白相互作用,为homodimerization9和不同的氨基末端结构域所需的TRFH域(图1A)。TRF2的N-末端结构域的碱性氨基酸残基的丰富(基本域),而N-末端域TRF1由酸性氨基酸残基(酸性域)(图1A)。我们产生了一系列的嵌合端粒重复因子(2000),通过类似TRF2域TRF1领域取代。由此产生的结构进行了测试他们的内源性TRF2使用TRF2条件损失补充能力(trf2floxed / floxed)小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)1。确保同步和完全耗尽我们用trf2floxed TRF2 / floxed携带诱导Cre重组酶细胞(rosa26-creert2)可以被激活,由4 -羟基(补充图1)。所有的交通运输结构的分析表明,在存在或缺乏内源性TRF2端粒的预期定位(补充图2A–
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  • 1楼网友:归鹤鸣
  • 2021-03-02 10:16
楼主,加 Me ,如翻译
  • 2楼网友:迟山
  • 2021-03-02 08:47
斑马鱼中原封不动的zn2+与ztrs的成像。然后我们采用ztrs来跟踪原封不动的锌离子在活体组织中的分布。斑马鱼是一种采用传感器来监测离子的良好动物模型,因为它可以用荧光显微镜法方便地检测离子、鱼体内离子和传感器的渗透性。因此,近年来斑马鱼已被广泛用来检测各种不同的离子,如hg2+、cu2+和zn2+17,36。斑马鱼的胚胎在生长过程中用5μm的ztrs在不同的时间点孵育36。在胚胎受精后19h(hpf),在子宫的底部观察到了绿色光斑的区域(图11a)17。在生长过程中,由绿色光斑构成的像项链一样的区域比较明亮,并且移动到子宫的顶部,直至48hpf为止(图11b,c)。在54hpf后,绿色光斑的区域不再观察到,只有分散的明亮斑点分布在心包的周围(图11d)。用100μm的tpen对54h大小的斑马鱼处理导致了绿色光斑的消失(图11e)。绿色光斑区域可能由ztrs或鱼体内内源的锌池而产生。我们观察到,当54h大的斑马鱼被暴露在外部的zn2+(20μm)中,然后用ztrs处理时,鱼身上的整个绿色荧光就会增加。这告诉我们,绿色光斑区域可能由鱼的内源锌离子,而不是因探测剂(探针)的螯合作用所产生的。在最近的研究中,guo和他的同事们在用nbd基传感器(nbd-tpea)染色的斑马鱼中发现了非常相似的绿色光斑17。籍助用nbd-tpea染色的原封不动的4天大小斑马鱼幼体的,初步的活体内zn2+成像,5天大小幼体的tpen添加实验,关于在分离的左右对称的发光区中锌的icp-ms(等离子体质谱法)数据,guo和他的同事相信,用nbd-tpea染色的斑马鱼的绿色光斑与为了斑马鱼的生长而储存的zn2+有关。在用ztrs处理时,没有观察到异常的生长缺陷,表明了它是生物上正交的。这些结果证明了ztrs用于检测生命有机体中生物学有关离子的有用性。
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