gfp基因表达需要什么条件

gfp基因表达需要什么条件

首先你概念错了，不是所有质粒之间不相容，只有近缘的质粒是不相容的，或者说ORI序列相同的质粒是不相容的。一个细菌中含有2种以上质粒是常有的事情。
当然可以构建别同一亲和群的穿梭质粒。

你只能构建或者直接用带有GFP的质粒转化你的细菌。但其实你这事情很多未知，因此难度较大。
1 不知道未知细菌中质粒的复制起始序列因此不能确定质粒进去之后能否复制自己。
2 启动子能否被识别，报告基因能否表达，你筛选方法不顶
3 土著质粒和新转入质粒之间能否亲和

针对这些 你只能一一排除
首先你可以试试把未知细菌中的质粒从你的细菌中去掉（很多物理方法），筛选空宿主（不含质粒的细菌），之后再把你的带有GFP的质粒转进去筛选便可。
得到空宿主，就排出了不相容性的可能性，条件就剩下转入质粒的ori和启动子是否识别，只要能识别ori和启动子 那你很幸运 直接就筛选到了。
但若一直不能筛选到 就麻烦了。你只能随机挑选被转化菌株，提取其中质粒查看是否成为隐秘质粒。若检测到隐秘质粒，侧说明ori可用，你需要对启动子进行优化。直到直接能筛选到你的报告基因GFP就完成了。

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