什么是梯度洗脱
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解决时间 2021-12-19 22:57
- 提问者网友：最美的风景
- 2021-12-19 11:41
什么是梯度洗脱
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- 五星知识达人网友：逐風
- 2021-12-19 12:21
问题一：什么是梯度洗脱 梯度性地改变洗脱液的组分(成分、离子强度等)或pH，以期将层析柱上不同的组分洗脱出来的方法。
梯度洗脱（gradient elution）又称为梯度淋洗或程序洗脱。在同一个分析周期中，按一定程度不断改变流动相的浓度配比，称为工度洗脱。
在气相色谱中，为了改善对宽沸程样品的分离和缩短分析周期，广泛采用程序升温的方法。而在液相色谱中则采用梯度洗脱的方法。在同一个分析周期中，按一定程度不断改变流动相的浓度配比，称为梯度洗脱。从而可以使一个复杂样品中的性质差异较大的组分能按各自适宜的容量因子k达到良好的分离目的。 梯度洗脱的优点：1.缩短分析周期；2.提高分离能力；3.峰型得到改善，很少拖尾；4.增加灵敏度。但有时引起基线漂移。
分级梯度洗脱
分级梯度洗脱是依据各种离子或离子化合物与离子交换剂的结合力不同而进行分离纯化的。离子交换层析的固定相是离子交换剂，它是由一类不溶于水的惰性高分子聚合物基质通过一定的化学反应共价结合上某种电荷基团形成的。离子交换剂可以分为三部分：高分子聚合物基质、电荷基团和平衡离子。电荷基团与高分子聚合物共价结合，形成一个带电的可进行离子交换的基团。平衡离子是结合于电荷基团上的相反离子，它能与溶液中其它的离子基团发生可逆的交换反应。平衡离子带正电的离子交换剂能与带正电的离子基团发生交换作用，称为阳离子交换剂；平衡离子带负电的离子交换剂与带负电的离子基团发生交换作用，称为阴离子交换剂。问题二：什么叫梯度洗脱？为什么要梯度洗脱 【梯度洗脱】又称为梯度淋洗或程序洗脱。在同一个分析周期中，按一定程序不断改变流动相的浓度配比，称为梯度洗脱。从而可以使一个复杂样品中的性质差异较大的组分能按各自适宜的容量因子k达到良好的分离目的。
在气相色谱中，为了改善对宽沸程样品的分离和缩短分析周期，广泛采用程序升温的方法。而在液相色谱中对组分复杂的样品则采用梯度洗脱的方法。
进行梯度洗脱可以达到以下目的：
1、缩短分析周期；
2、提高分离能力；
3、峰型得到改善，很少拖尾；
4、增加灵敏度，但有时引起基线漂移。问题三：HPLC法中，等度与梯度洗脱有什么区别？两者分别适合怎样组分的分离？ 梯度洗脱：在同一个分析周期中，按一定程序不断改变流动相的浓度配比 等度洗脱则是指从头到尾只是用同一个流动相。
用不用梯度洗脱，主要看杂质的情况。同一物质有梯度和等度两种条件时，梯度的认可度较高。杂质与杂质、主峰、溶剂峰的分离度一定要好（不好的话就要用梯度）。
（1）杂质和主成分极性相差很大，杂质一定要全部都能洗脱出来（有时等度情况下从两三个小时杂质也冲出不来，就必须考虑等度）。
（2）杂质和主成分极性相差较大，杂质出峰太晚（等度冲两个小时出来个杂质，就可以通过梯度缩短检样时间）
（3）还有就是杂质极性比主峰的大，等度时要想主峰时间合适杂质全堆在前边，杂质分开主峰又出峰太晚，这种情况也得考虑梯度洗脱。
在能达到较好的分离度的情况下能用等度就用等度，毕竟用梯度要麻烦一些。
希望对你有帮助。问题四：高效液相色谱法中什么是洗脱梯度 多个时间段里 流动相比例不一样 就是梯度洗脱
比如0~10分钟之间 流动相A:B 90:10
10~15分钟 流动相A:B 70:30问题五：什么叫梯度淋洗 所谓梯度淋洗就是载液（即流动相）中含有两种（或更多）不同极性的溶剂，在分离过程中按一定的程序连续改变载液中溶剂的配比和极性，通过载液中极性的变化来改变被分离组分的分离因素，以提高分离效果。简单来说，便是指淋洗液的组成、成分等随时间改变，溶剂比例不同。问题六：等梯度HPLC具体怎么操作，什么时候用等梯度什么时候用梯度洗脱呢？ 这两者只相差一个输液泵。具体操作，你可以看液相的操作说明书。等度是你检测是不用改变流动相的，而梯度是要求改变流动相的。梯度也多一个梯度混合器。
梯度洗脱（gradient elution）又称为梯度淋洗或程序洗脱。在同一个分析周期中，按一定程度不断改变流动相的浓度配比，称为工度洗脱。
在气相色谱中，为了改善对宽沸程样品的分离和缩短分析周期，广泛采用程序升温的方法。而在液相色谱中则采用梯度洗脱的方法。在同一个分析周期中，按一定程度不断改变流动相的浓度配比，称为梯度洗脱。从而可以使一个复杂样品中的性质差异较大的组分能按各自适宜的容量因子k达到良好的分离目的。 梯度洗脱的优点：1.缩短分析周期；2.提高分离能力；3.峰型得到改善，很少拖尾；4.增加灵敏度。但有时引起基线漂移。
分级梯度洗脱
分级梯度洗脱是依据各种离子或离子化合物与离子交换剂的结合力不同而进行分离纯化的。离子交换层析的固定相是离子交换剂，它是由一类不溶于水的惰性高分子聚合物基质通过一定的化学反应共价结合上某种电荷基团形成的。离子交换剂可以分为三部分：高分子聚合物基质、电荷基团和平衡离子。电荷基团与高分子聚合物共价结合，形成一个带电的可进行离子交换的基团。平衡离子是结合于电荷基团上的相反离子，它能与溶液中其它的离子基团发生可逆的交换反应。平衡离子带正电的离子交换剂能与带正电的离子基团发生交换作用，称为阳离子交换剂；平衡离子带负电的离子交换剂与带负电的离子基团发生交换作用，称为阴离子交换剂。问题二：什么叫梯度洗脱？为什么要梯度洗脱 【梯度洗脱】又称为梯度淋洗或程序洗脱。在同一个分析周期中，按一定程序不断改变流动相的浓度配比，称为梯度洗脱。从而可以使一个复杂样品中的性质差异较大的组分能按各自适宜的容量因子k达到良好的分离目的。
在气相色谱中，为了改善对宽沸程样品的分离和缩短分析周期，广泛采用程序升温的方法。而在液相色谱中对组分复杂的样品则采用梯度洗脱的方法。
进行梯度洗脱可以达到以下目的：
1、缩短分析周期；
2、提高分离能力；
3、峰型得到改善，很少拖尾；
4、增加灵敏度，但有时引起基线漂移。问题三：HPLC法中，等度与梯度洗脱有什么区别？两者分别适合怎样组分的分离？ 梯度洗脱：在同一个分析周期中，按一定程序不断改变流动相的浓度配比 等度洗脱则是指从头到尾只是用同一个流动相。
用不用梯度洗脱，主要看杂质的情况。同一物质有梯度和等度两种条件时，梯度的认可度较高。杂质与杂质、主峰、溶剂峰的分离度一定要好（不好的话就要用梯度）。
（1）杂质和主成分极性相差很大，杂质一定要全部都能洗脱出来（有时等度情况下从两三个小时杂质也冲出不来，就必须考虑等度）。
（2）杂质和主成分极性相差较大，杂质出峰太晚（等度冲两个小时出来个杂质，就可以通过梯度缩短检样时间）
（3）还有就是杂质极性比主峰的大，等度时要想主峰时间合适杂质全堆在前边，杂质分开主峰又出峰太晚，这种情况也得考虑梯度洗脱。
在能达到较好的分离度的情况下能用等度就用等度，毕竟用梯度要麻烦一些。
希望对你有帮助。问题四：高效液相色谱法中什么是洗脱梯度 多个时间段里 流动相比例不一样 就是梯度洗脱
比如0~10分钟之间 流动相A:B 90:10
10~15分钟 流动相A:B 70:30问题五：什么叫梯度淋洗 所谓梯度淋洗就是载液（即流动相）中含有两种（或更多）不同极性的溶剂，在分离过程中按一定的程序连续改变载液中溶剂的配比和极性，通过载液中极性的变化来改变被分离组分的分离因素，以提高分离效果。简单来说，便是指淋洗液的组成、成分等随时间改变，溶剂比例不同。问题六：等梯度HPLC具体怎么操作，什么时候用等梯度什么时候用梯度洗脱呢？ 这两者只相差一个输液泵。具体操作，你可以看液相的操作说明书。等度是你检测是不用改变流动相的，而梯度是要求改变流动相的。梯度也多一个梯度混合器。
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- 1楼网友：西岸风
- 2021-12-19 14:00
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