小鼠组织样品,冻存后还能用来流式细胞术分析吗
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解决时间 2021-01-25 19:53
- 提问者网友:温柔港
- 2021-01-25 00:43
如果新鲜取到的样品不能及时做流式细胞术分析,那么可以将组织冻存在-80度,然后过一段时间再融化做流式细胞分析和sort吗?
最佳答案
- 五星知识达人网友:春色三分
- 2021-01-25 01:12
组织冻存是需要液氮的。-80冻存后,由于温度不够,再融化由于在细胞内内会形成冰晶,导致细胞破裂。
新鲜的组织应该立刻先分离得到单细胞悬液,并染色。如果没有时间上机。可以在染色后固定细胞。而不是先固定再染色。
新鲜的组织应该立刻先分离得到单细胞悬液,并染色。如果没有时间上机。可以在染色后固定细胞。而不是先固定再染色。
全部回答
- 1楼网友:旧脸谱
- 2021-01-25 02:12
你要问什么问题呢?我猜是抗体来源,小鼠还是大鼠的好?这个完全取决于抗体的表现了。
流式实验一般都选用直接标记的荧光抗体。不管是小鼠的还是大鼠的,都需要做抗体浓度的测试。具体来说,就是以厂家建议的浓度为基础,等倍稀释,或者加量。形成一个系列的浓度。在同样细胞数,浓度的样本管中染色后上机。测试出该抗体的染色指数。染色指数是这样计算的:
在柱状图上分出阴性和阳性细胞群,分别计算出平均荧光强度,和阴性细胞的荧光强度的标准差。按照格式计算。每个浓度可以得到一个si。然后再把si制图
图中绿框标出的就代表根据si得出的最佳抗体浓度了。
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