做western blot时怎么做beta actin

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解决时间 2021-02-25 13:48

提问者网友：精神病院里
2021-02-25 07:02

新手一枚，打算做大鼠脑组织的western blot，想做个beta actin，但是不知道这个要怎么做，需要加抗体什么的吗？该如何做？求详细步骤说明。

最佳答案

五星知识达人网友：青尢
2021-02-25 08:28

需要加beta-actin的一抗，beta-actin分子量42，如果您的蛋白也是差不多大小，那么需要上两次样品，分别做您的目的蛋白和beta-actin，当然您如果做熟练了也可以上一次样，先做目的抗体，压片后strip膜再做beta-actin。如果您的目的蛋白在其他位置，那更方便，上一次样，封闭后把膜裁开，分别加您的目的蛋白一抗和beta-actin的一抗。

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1楼网友：几近狂妄
2021-02-25 09:03

是的，β-actin 是管家基因编码的细胞骨架蛋白，表达量在细胞内相对稳定，很少受到其他因素的影响，因此常被选作实验内参

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