下一步要做real time pcr，逆转录引物怎么选择，随机引物和oligo dT引物选哪个比较好

答案:2 悬赏:10 手机版

解决时间 2021-01-04 07:28

提问者网友：沦陷
2021-01-03 14:14

real time pcr检测几个基因的表达量，现在提取rna后做逆转录，买的takara的逆转录试剂盒，不知道应该选随机引物还是oligo dT引物？我是小白，请大家给予建议啊

最佳答案

五星知识达人网友：孤老序
2021-01-03 15:53

显然是选random primer更好，其实说明书是有写的啦，原因是RT-PCR逆转录是要得到一个所有的RNA的cDNA库，然后再P出你要的“几个基因”，所以不是每个基因的mRNA都是有polyA的，很多都是没有的，microRNA，piRNA，很多都没有哦，所以如果你用oligo dT引物，就自然会miss掉很多（确实是很多）的RNA，而随机引物不会有这个问题，用它反转录出来的cDNA丰度更高，结果更加准确！！

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1楼网友：思契十里
2021-01-03 16:36

我不会~~~但还是要微笑~~~：）

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