口蹄疫是由口蹄疫病毒引起的一种偶蹄动物传染病，目前常用接种弱毒疫苗的方法预防。疫苗的主要成分是该病毒的一种结构蛋白VPI。科学家尝试利用转基因番茄来生产口蹄疫疫苗，过程如下图1所示

口蹄疫是由口蹄疫病毒引起的一种偶蹄动物传染病，目前常用接种弱毒疫苗的方法预防。疫苗的主要成分是该病毒的一种结构蛋白VPI。科学家尝试利用转基因番茄来生产口蹄疫疫苗，过程如下图1所示。图2表示目的基因与pZHZ1质粒构建重组质粒的过程，E、F、G、H分别为A、B、C、D四种不同限制酶的酶切位点。请据图回答。

⑴口蹄疫病毒的遗传物质为RNA，要获得VPI基因可通过 方法获得。
⑵如图2所示，若限制酶A、B切割出的末端完全不同，那么用这种双酶切的方法构建重组质粒的优点是 。
⑶已知质粒pZHZ1的长度为3.7kb，（1kb=1000对碱基）其中EF区域长度为0.2kb，GE区域长度为0.8kb，FH区域长度为0.5kb。现分别用限制酶C、D切割重组质粒pZHZ2样品，结果被酶C切割成1.6kb和3.1kb两个片段，被酶D切割成1.2kb和3.5kb两个片段。据酶切结果判断VPI基因大小为 kb。
⑷过程⑥的培养基中除了加入各种必需营养物质和 等激素外，还需要添加 筛选出含有重组质粒的叶片小段。
⑸获得表达VPI蛋白的番茄植株以后，需要进行免疫效力的测定。具体方法是：将转基因番茄叶片提取液注射到豚鼠体内，每半个月注射一次 ，三次后检测豚鼠血液内产生的 的数量。逆转录

(答案→)逆转录 解析：（1）由RNA到DHA过程是逆转录。（2）由于两种S切割出的末端不同，切出的质粒和目的基因不会自己成环，在目的基因连接到开环质粒时也能保证插入部位和方向的准确性。（3）原质粒（3.7kb）中EF段0.2kb、FH点0.5kb、HG段2.2kb、GE段0.8kb，依据重组质粒切割后的数据分祈，目的基因（替换EF段）的长度为1.2kb。（4）植物组织培养需加入生长素和细胞分裂素以调节分裂和分化；导入的重组质粒上有抗卡那霉素基因，可以在含卡那霉素的培养基上生存（5）转基因番茄叶片提取液中含有VPI蛋白，会引发豚鼠产生对口蹄疫病毒的免疫反应，生成对应的口蹄疫病毒抗体。

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