如何克隆出全长基因

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解决时间 2021-03-18 15:44

提问者网友：浮克旳回音
2021-03-17 20:59

如何克隆出全长基因

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五星知识达人网友：渡鹤影
2021-03-17 22:27

如何克隆出全长基因
百度搜索NCBI gene，然后将你想查找的基因名称输入，搜索，在接下来出现的表格中选择你要查找基因（主要是为了选择物种），然后在接下来的页面找到基因的各种亚型对应的mRNA序列编号，点进去，在一长串信息中找到CDS，点一下就会在页面下方的mRNA序列上显示出CDS序列。
生物芯片是高密度固定在固相支持介质上的生物信息分子的微列阵。列阵中每个分子的序列及位置都是已知的，并按预先设定好的顺序点阵。基因芯片是生物芯片的一种，其上固定的是核算类物质，主要用于DNA、RNA分析。分为DNA芯片和微点阵两种。
分离目的基因是是指从基因组中发现或找出某个目的（标）基因。目前是通过①比较不同物种之间，或同一物种不同个体之间；或同一个体在不同生长发育是期或不同环境条件下基因差异表达（基因表达平行分析）来实现的。采用基因芯片技术进行基因差异表达研究可以通过杂交直接检测到细胞中mRNA的种类及丰度，与传统的差异显示相比具有样品用量小，自动化程度高，被检测目标DNA密度大及并行种类多等优点。②利用同源探针从cDNA或EST微列阵中筛选分离目的基因。目前有DNA 芯片、cDNA芯片两种。其基本步骤包括：基因芯片的制备、靶样品制备、杂交与检测、目的基因得分离并获得全长。

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1楼网友：一袍清酒付
2021-03-17 23:48

基因做表达实验必须要克隆全长步骤：1，rna抽提（同rt） 2，逆转录，使用合成的oligo 3，p内参 4，使用根据已知序列设计的上游引物和提供下游引物做pcr，注意设计上游引物是退火温度与下游引物相差不大。 5，产物切胶回收，ta克隆测序这个oligo和下游引物是我根据takara和bd公司的manual自己设计的，经过我的使用效果很好。具体操作参照takara的3－racemanual。你先做3－race，了解熟悉下，成功后再做5－race。5－race要买试剂盒做，较为复杂！

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