DNA电泳时，PCR产物样品里要加maker吗

DNA电泳时，PCR产物样品里要加maker吗

PCR实验本身中不需要加入marker,但是在PCR过后跑电泳的时候需要加入marker.用来对比PCR产物的大小,看看产物的电泳条带是不是符合你的预期的。


PCR中加marker的原因：
marker是人为的把一系列已知大小的DNA（或已知质量的蛋白,当然PCR中用的是DNA marker不是蛋白marker）混合在一起,在电泳的时候对照用.跑完电泳之后,会看到marker的有几条清楚的条带,而每条的大小都是可以在这个marker的说明书上查到的.所以,条带对照,就大体知道你需要的条带的大小范围了。


PCR：

PCR(聚合酶链式反应）是利用DNA在体外摄氏95°高温时变性会变成单链，低温（经常是60°C左右）时引物与单链按碱基互补配对的原则结合，再调温度至DNA聚合酶最适反应温度（72°C左右），DNA聚合酶沿着磷酸到五碳糖(5'-3')的方向合成互补链。基于聚合酶制造的PCR仪实际就是一个温控设备，能在变性温度，复性温度，延伸温度之间很好地进行控制。


marker：
标记（Marker），染色体上一个可以被识别的区域（比如限制性内切酶的酶切点，基因的位置等）。标记的遗传能够被检测出来。标记可以是染色体上有表达功能的部分（比如基因），也可以是没有编码蛋白质功能但遗传特性能够被检测出来的部分。

pcr产物电泳拖尾,可能有如下原因：a.模板不纯.b.退火温度偏低.c.酶量过多,dntp、mg2+浓度偏高.d.循环次数过多. 解决办法：a.纯化模板.b.适当提高退火温度.c.降低酶量,适当降低dntp和镁离子的浓度.d.减少循环次数

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