Axygen mini-prepare 质粒提取试剂盒中的Buffer S1,S2,S3,W1,W2都是什么成分
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解决时间 2021-02-27 00:04
- 提问者网友：原来太熟悉了会陌生
- 2021-02-26 04:58
Axygen mini-prepare 质粒提取试剂盒中的Buffer S1,S2,S3,W1,W2都是什么成分
最佳答案
- 五星知识达人网友：独行浪子会拥风
- 2021-02-26 05:33
这是人家公司保密的东西，要内部人才会知道。不过根据其原理，应该可以推测出各溶液大致的组分吧（当然具体的浓度有些公司会优化，而略不同于分子克隆）。
S1：溶菌的buffer，无外乎提供缓冲条件的25mM tris-cl,螯合二价离子的10mM EDTA（抑制降解核酸的酶活），更利于细菌悬浮的50mM葡萄糖；
S2: 0.2 N NaOH & 1% SDS（裂解细胞，变性蛋白和DNA）；
S3：5M 醋酸钾（结合SDS，沉淀蛋白和基因组DNA），2M冰醋酸（中和S2的碱，使质粒DNA复性）；
W1：去蛋白液（一般是含异丙醇（可能50%）和sds等去污剂的水溶液）
W2:70-75%乙醇，洗涤除盐（可能含有一些螯合盐的螯合剂？）
S1：溶菌的buffer，无外乎提供缓冲条件的25mM tris-cl,螯合二价离子的10mM EDTA（抑制降解核酸的酶活），更利于细菌悬浮的50mM葡萄糖；
S2: 0.2 N NaOH & 1% SDS（裂解细胞，变性蛋白和DNA）；
S3：5M 醋酸钾（结合SDS，沉淀蛋白和基因组DNA），2M冰醋酸（中和S2的碱，使质粒DNA复性）；
W1：去蛋白液（一般是含异丙醇（可能50%）和sds等去污剂的水溶液）
W2:70-75%乙醇，洗涤除盐（可能含有一些螯合盐的螯合剂？）
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