导入空载体与不导入外源基因有什么区别

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解决时间 2021-01-20 12:28

提问者网友：龅牙恐龙妹
2021-01-19 14:16

导入空载体与不导入外源基因有什么区别

最佳答案

五星知识达人网友：骨子里都是戏
2021-01-19 15:25

1、获取目的基因 2、形成重组DNA分子 3、将重组DNA分子导入受体细胞 4、筛选含有目的基因的受体细胞 5、目的基因表达
工具：限制性核酸内切酶（切割磷酸二酯键）、DNA连接酶（链接磷酸二酯键）、载体（主要为质粒、原核小型环状DNA）
获取目的基因：若序列已知则用PCR扩增或化学方法合成：若序列未知则建立基因文库，从中获取
形成重组DNA分子：用同一限制性核酸内切酶切割质粒和目的基因形成相同的粘性末端，再用目的基因链接
将重组DNA分子导入受体细胞：若受体为动物用显微法：若受体为植物用农杆菌转化法或花粉管法：若受体为微生物用氯化钙处理法（增加细胞壁通透性）
筛选含有目的基因的受体细胞：利用载体上的标记基因进行筛选
目的基因表达：个体水平上的性状，分子水平上的相应蛋白质、mRNA

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