是否目的基因在PCR扩增时不用在引物中加入酶切位点,就可与pGEM-T载体连接?为什么?
是否目的基因在PCR扩增时不用在引物中加入酶切位点,就可与pGEM-T载体连接?为什么?
答案:1 悬赏:60 手机版
解决时间 2021-07-21 06:45
- 提问者网友：战皆罪
- 2021-07-21 00:56
最佳答案
- 五星知识达人网友：轻雾山林
- 2021-07-21 02:32
那要看你做什么用,如果下一步你要构建载体的话,就需要相应的酶切位点,以便下一步操作.如果不做就没必要了.
再问： 只是想送去测序...为什么可以直接连接呢？
再答： 那就没必要加酶切位点了，因为现在的聚合酶一般都会在PCR扩增完之后自动3’端加A，形成了一个粘性的末端，而你的载体是末端加的T,的粘性末端。这样运用连接体系就可以连到一起了。
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